补阳还五汤对高血压病气虚血瘀证内皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

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目的 探讨补阳还五汤对高血压病气虚血瘀证内皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响.方法 以高血压病气虚血瘀证患者血清作用于体外培养的CRL-1730,彗星实验、流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法(Western Blot)、激光共聚焦显微镜观察检测凋亡相关蛋白表达,并观察补阳还五汤保护作用的量效关系.结果 彗星实验结果显示:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证组、非气虚血瘀证组彗星尾部DNA含量明显升高(P<0.01);与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤各剂量组彗星尾部DNA含量明显降低(P<0.01).流式细胞术结果显示:与健康组相比,高血压病气虚血瘀证细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与高血压病气虚血瘀证组相比,补阳还五汤高剂量组凋亡率明显降低(P<0.01).Western Blot结果显示:与健康组比较,高血压病气虚血瘀证组半胱天冬氨酸酶-3(Caspase-3)、P53、P 微管蛋白(P-tubulin)、Fas、Fas配体(FasL)、Bcl2-Associated X的蛋白质(BCL2-Associated X Protein,Bax)的表达均明显升高(P<0.01或P<0.05),B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)明显降低(P<0.01);与高血压病气虚血瘀证组比较,补阳还五汤各剂量组Caspase-3、P53、β-tubulin、Fas、FasL、Bax表达均明显降低(P<0.01或P<0.05),Bcl-2表达明显升高(P<0.01).激光共聚焦显微镜结果显示:与健康组比较,高血压病气虚血瘀证组Caspase-3、P53、Fas、FasL、Bax的表达均明显升高,Bcl-2明显下降(P<0.01);与高血压病气虚血瘀证组比较,.补阳还五汤各剂量组Caspase-3、P53、Fas、FasL、Bax表达均明显降低,Bcl-2明显升高(P<0.01).β-tublin蛋白表达各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 补阳还五汤能减轻高血压病气虚血瘀证患者血清诱导的CRL-1730凋亡,这可能与调节Caspase-3、P53、β-tubulin、Fas、FasL、Bax、Bcl-2蛋白表达有关.
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