冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN和GRB10DNA甲基化及表达的影响

来源 :山东大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenman1982
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目的探讨精液冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN、GRB10甲基化状态和mRNA表达的影响。方法将20份人精液标本平行分为2组:新鲜组(n=20)和冷冻组(n=20)。采用计算机辅助精子分析(CASA)进行两组精液的常规参数检测;Percoll密度梯度离心法纯化精子,SNRPN、GRB10基因的甲基化率采用Sequenom DNA测序分析;SNRPN、GRB10基因的mRNA表达采用qRT-PCR定量分析。结果冷冻组精子浓度、精子活力、前向运动精子百分比均低于新鲜组(P<0.05),冷冻组不活动精子百分比显著高于新鲜组(P<0.05);冷冻组精子SNRPN mRNA表达显著低于新鲜组(P<0.05);冷冻组精子GRB10启动子区亚片段检测的-902Cp G位点(即转录起始点上游989 bp处)的甲基化率显著下降(P<0.05);GRB10 mRNA表达较新鲜组显著升高(P<0.05)。结论冷冻复苏过程影响人精子GRB10、SNRPN基因的DNA甲基化和mRNA表达,提示精子库常规使用的精液冻储技术可能改变配子的表观遗传信息,进而调控基因的表达。
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