稳定高效表达正反义Alu-Sx细胞系的建立

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaoqiongfang
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目的 建立稳定高效表达正反义Alu—Sx的细胞系。方法 根据Alu亚家族Sx序列合成两对两端带有限制性酶切位点的引物,提取HEK293细胞的总DNA后PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA3.1/myc-HisA中构建成重组体。经酶切及测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染HEK293细胞后G418筛选稳定表达的细胞克隆,Northern杂交检测并挑选出表达最强的亚克隆。结果成功构建Alu亚家族Sx的正反义真核表达载体并获得高效稳定表达的HEK293细胞亚克隆。结论 高效稳定表达正反义Alu Sx的HE
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