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目的探讨革兰氏阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBL）耐药情况。方法回顾性分析224例临床送检标本的常规细菌鉴定、药敏检测及ESBL测定结果。结果革兰氏阴性杆菌对头孢菌素普遍存在较高的耐药率。分离率前三位的革兰氏阴性杆菌为大肠埃希菌46株（20．53％）、肺炎克雷伯菌38株（16．96％）和铜绿假单胞菌27株（12．05％）。结论革兰氏阴性杆菌的超广谱B～内酰胺酶类抗生素耐药性较高，临床治疗工作中需加强监控，避免院内感染。