【摘 要】
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以光敏雄性不育系A31及其恢复系1376为材料,使用美国MGREACHE公司生产的PTC-200型PCR,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、Mg2+、dNTPs、引物和TapDNA聚合酶的
【机 构】
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西北农林科技大学农学院,西北农林科技大学植保学院,杨凌职业技术学院
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以光敏雄性不育系A31及其恢复系1376为材料,使用美国MGREACHE公司生产的PTC-200型PCR,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、Mg2+、dNTPs、引物和TapDNA聚合酶的适宜浓度和最佳的循环次数,实验结果表明在25 μL反应体系中使用20～40 ng的模板DNA,1.5～2.0 mmol/L的Mg2+,0.3～0.4 mmol/L的dNTPs,0.15～0.20 μmol/L随机引物,1.0～1.5单位TaqDNA聚合酶;反应条件为94℃预变性5 min,然后进行94℃
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