【摘 要】
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自由基过量导致氧化还原稳态被破坏,从而引发一系列疾病,服用食源性抗氧化肽可阻止氧化应激的发生。为深入挖掘藻渣的高附加值,本文开展雨生红球藻抗氧化肽的制备和活性研究。将雨生红球藻蛋白酶解物作为原料,以ABTS自由基清除力为活性跟踪指标,通过超滤、制备型和分析型液相色谱,纯化制备抗氧化多肽组分;经液相色谱串联质谱法鉴定氨基酸序列,同时采用分子对接技术筛选并确定雨生红球藻抗氧化肽,并揭示作用机理;进而基
【基金项目】
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国家自然科学基金(32172195); 广东省自然科学基金面上项目(2021A1515012158); 广东省新能源和可再生能源研究开发与应用重点实验室开放基金项目(E139kf0301);
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自由基过量导致氧化还原稳态被破坏,从而引发一系列疾病,服用食源性抗氧化肽可阻止氧化应激的发生。为深入挖掘藻渣的高附加值,本文开展雨生红球藻抗氧化肽的制备和活性研究。将雨生红球藻蛋白酶解物作为原料,以ABTS自由基清除力为活性跟踪指标,通过超滤、制备型和分析型液相色谱,纯化制备抗氧化多肽组分;经液相色谱串联质谱法鉴定氨基酸序列,同时采用分子对接技术筛选并确定雨生红球藻抗氧化肽,并揭示作用机理;进而基于秀丽隐杆线虫模型,评价藻多肽的体内抗氧化活性。结果表明,雨生红球藻多肽组分的抗氧化能力经分离提高2.96倍,选择自由基清除力最强的组分i(0.25 mg/mL时ABTS清除率96.97%±2.00%)进行结构鉴定,获得10条多肽序列i-1~i-10;分子对接结果显示,i-1与ABTS自由基的最小结合自由能最低,表明其抗氧化能力相对最强,确定雨生红球藻新型抗氧化肽HPp(Haematococcus pluvialis antioxidant peptide)序列为KFTPAP。体内实验表明,HPp能有效改善秀丽线虫的抗氧化能力(P < 0.05),包括SOD、CAT酶活及MDA含量,且在100 μmol/L时效果最佳。本团队推测C端聚集疏水性氨基酸、含有苯丙氨酸和来源于叶绿素蛋白,可能是HPp具有较强抗氧化能力的原因。研究结果为雨生红球藻藻渣的高值化利用提供理论指导,并为食源性抗氧化剂的开发提供思路。
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