【摘 要】
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目的 探讨RT-ARMS-qPCR(real time amplification refractory mutation system quantitativePCR)系统定量测定线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)A1555G位点突变在线粒体耳聋发病机制研究中的价值.方法 以PeR扩增含mtDNA 1555位点的片段,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒
【机 构】
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350005福州,福建医科大学附属第一医院检验科福建医科大学基因诊断研究室福建医科大学医学检验系,350005福州,福建医科大学附属第一医院检验科福建医科大学基因诊断研究室福建医科大学医学检验系,35
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目的 探讨RT-ARMS-qPCR(real time amplification refractory mutation system quantitativePCR)系统定量测定线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)A1555G位点突变在线粒体耳聋发病机制研究中的价值.方法 以PeR扩增含mtDNA 1555位点的片段,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒标准品;在引物3'端插入错配碱基AC建立RT-ARMS-qPCR系统,对含突变型和野生型mtDNA 1555位点片段的12例线粒体耳聋患者进行定量检测.结果 RT-ARMS-qPCR系统在检测1个含野生型mtDNA 1555的重组质粒DNA模板时,其批内变异系数(CV)为1.34%,批间CV为1.96%,线性范围为102-108拷贝/ul;突变型或野生型引物只特异扩增相对应的序列,特异性好;突变型/野生型mtDNA拷贝数及突变型所占的百分比与耳聋的严重程度相关(r=0.771,P=0.003),突变型mtDNA所占的比例越高,耳聋程度越严重.结论 RT-ARMS-qPCR系统适合于定量检测mtDNAA1555G点突变的线粒体DNA片段,结果特异、稳定、准确.线粒体耳聋的严重程度与含突变型和野生型mtDNA 1555位点的拷贝数比例有关。
其他文献
目的 评价醛固酮与肾素活性比值(ALD/PRA,ARR)对原发性醛固酮增多症(PA)的诊断价值.方法 回顾性收集44例PA、9例嗜铬细胞瘤、8例无功能性瘤、12例库欣综合征、4例肾动脉狭窄及13例原发性高血压患者的ALD、PRA结果,计算ARR,采用受试者操作特性(ROC)曲线评价各项指标的诊断价值.结果 卧位ALD ROC曲线下面积为0.947,临界值(cut-off值)为174.1 ng/L时
病历摘要 患者男,79岁.2007年10月13日主因"咯血3 d"入院.患者10月10日受凉后咯血,暗红色,有血块,约10 ml,伴乏力、胸部不适,无发热、盗汗、胸痛等症状.诊断为左下叶支气管扩张,肺炎;给予止血、抗炎药物对症治疗后,患者病情好转.但血常规示白细胞增高、淋巴细胞增高、血小板减少、贫血,疑为慢性淋巴细胞白血病,为明确诊断行骨髓细胞学、骨髓病理学、外周血免疫分型检查。
目的 探讨以苯基硼酸(Phenylboronic acid,PBA)和氟氯西林(Flucloxacillin,FCC)为抑制剂检测持续高产和质粒介导的AmpC β内酰胺酶(AmpC-BLA)的可靠性.方法 以PBA和FCC作为AmpC-BLA的抑制剂,采用双纸片增效试验、双纸片协同试验,分别检测阳性控制菌株阴沟肠杆菌(029M)、质粒介导的ACT-1型大肠埃希菌DHSa2919、MOX-1型肺炎克
编辑同志：《中华检验医学杂志》2007年9期刊登了陈文祥等《临床检验的测量不确定度》一文，以及2006年第7期张霁艳等的类似文章。文章对计量领域不确定度的概念和应用等作了概要的介绍，并介绍了国际上要求临床检验使用不确定度的情况。我认真阅读后，总感到文章还有某些重要观点没有表达清楚；而且，究竟临床检验的常规检验结果是否必须引入不确定度，作者对这个关键问题没有表达出自己的观点。
肠球菌是重要的条件致病菌之一,不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等.近年来抗菌药物的广泛应用,使肠球菌对多种抗菌药物产生耐药,并成为导致医院感染的重要致病菌.由于肠球菌对抗生素的耐药性增加,特别是近年出现的万古霉素耐药肠球菌(VRE)给临床治疗造成困难.本研究分析了杭州市分离到的两株VRE菌株的克隆相关性、耐药性及耐药传播机制,为VRE感染的防
淋巴细胞免疫亚群构成比是机体免疫功能评价的重要指标之一,了解白血病患者初诊时的此项指标对其免疫功能恢复的判断、预后的评估具有重要意义[1-2]。
编辑同志: 拜读贵刊2007年第30卷第8期<自身免疫性溶血性贫血一例诊断与治疗评析>[1]一文后,对于自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的实验室诊断与治疗,有了更加深入的了解,受益匪浅,但是对于此例患者所做的实验室检查,笔者觉得有一点是值得讨论的,在此提出不同意见,以供商榷。