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小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定

来源 :东北农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bushliu

【摘 要】

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根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒（PPRV）Nigeria75／1株N基因序列进行人工合成，在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接，经测序分析后将N1-N

【作 者】

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祁光宇 刘斌 陈晓宇 王赛错 苟慧天 黄银君 穆克斌 刘学荣 

【机 构】

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中农威特生物科技股份有限公司,中国农业科学院兰州兽医研究所

【出 处】

：

东北农业大学学报

【发表日期】

：

2013年9期

【关键词】

：

小反刍兽疫病毒 N1-N5基因 搭桥PCR 原核表达 可溶性 SDS-PAGE WESTERN-BLOT PPRV  N1-N5 gene  Overlap-e 

【基金项目】

：

甘肃省科技计划项目（1104NKCA167）

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根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒（PPRV）Nigeria75／1株N基因序列进行人工合成，在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接，经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a（＋）相连接，构建pET-32a-N1-N5 质粒。将pET-32a-N1-N5转化于TransB（DE3）原核表达感受态细胞后用1PTG诱导表达，将纯化重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明，所表达蛋白以可溶性形式表达并具有能与

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