【摘 要】
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目的:研究miR-29a对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、迁移、侵袭及人张力蛋白同源物基因/蛋白激酶B/糖原合成酶(PTEN/AKT/GSK-3β)通路的影响.方法:体外培养GBM细胞系TG-905,分为空白对照组(NG 组)、阴性对照组(mimics-NC 组)、miR-29a 过表达组(miR-29a-mimics 组)和 PTEN 抑制剂组(miR-29a-mimics+Bpv组).CCK-8法、平板克隆实验检测各组细胞增殖情况;划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞迁移、侵袭能力;免疫印
【机 构】
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河北北方学院附属第一医院神经外科,河北张家口 075000
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目的:研究miR-29a对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、迁移、侵袭及人张力蛋白同源物基因/蛋白激酶B/糖原合成酶(PTEN/AKT/GSK-3β)通路的影响.方法:体外培养GBM细胞系TG-905,分为空白对照组(NG 组)、阴性对照组(mimics-NC 组)、miR-29a 过表达组(miR-29a-mimics 组)和 PTEN 抑制剂组(miR-29a-mimics+Bpv组).CCK-8法、平板克隆实验检测各组细胞增殖情况;划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞迁移、侵袭能力;免疫印迹法检测细胞增殖相关核抗原(PCNA)、迁移及侵袭相关蛋白[基质金属蛋白酶9(MMP-9)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)]及通路相关蛋白(PTEN、p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、GSK-3β、β-catenin)表达变化.结果:细胞转染成功;与 NG 组、mimics-NC 组比较,miR-29a-mimics 组TG-905细胞增殖抑制率及PTEN、E-Cadherin、PTEN、GSK-3β蛋白表达显著升高(P＜0.05),细胞克隆形成率、划痕愈合率、侵袭数及Ki-67、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达显著降低或减少(P＜0.05);与miR-29a-mimics组比较,miR-29a-mimics+Bpv组TG-905细胞增殖抑制率及PTEN、E-Cadherin、PTEN、GSK-3β蛋白表达显著降低(P＜0.05),细胞克隆形成率、划痕愈合率、侵袭数及Ki-67、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达显著升高或增加(P＜0.05).结论:过表达miR-29a可能通过上调PTEN表达抑制PI3K/Akt/GSK-3β信号通路活化抑制TG-905细胞增殖、侵袭及迁移.
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