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目的：构建家蝇抗菌肽Defensin基因多拷贝串联体，并克隆到甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K上。方法：PCR法扩增家蝇抗菌肽Defensin基因成熟肽片断，目的片断的上游5′端带有EcoR Ⅰ和Nhe Ⅰ位点，下游5′端带有Not Ⅰ和Xba Ⅰ位点，目的片断首先克隆入pMD18-T载体，利用pMD18-T载体的NdeⅠ位点和目的片断上的一对同尾酶（NheⅠ和XbaⅠ），多次酶切连接，串联成多拷贝的Defettsin成熟肽基因，再用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切，最后克隆人甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K。