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根据GenBank中BHV-1 Colorado1毒株的全基因组序列,针对班基因的主要B细胞免疫区域设计一对引物。提取BHV-1Colorado1毒株的基因组DNA,PCR扩增大小为585bp的gB片段,将其克隆至pET-22b(+)原核表达载体并测序分析,同时用NdeI和NotI酶切鉴定。SDS—PAGE和Western blot试验结果证明,获得的可溶性gB重组蛋白能与牛传染性鼻气管炎病毒标准阳性WEI血清发生特异性反应,为ELISA等免疫诊断方法的建立奠定了物质基础。