【摘 要】
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目的 观察异丙酚通过缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/细胞外调节激酶（ERK）通路对缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤的影响。方法 新生SD大鼠离体培养原代海马神经元细胞，随机分为6组。对照组（高糖DMEM培养液）、缺氧组（低糖DMEM培养液）、LP组（3 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）、MP组（6 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）、HP组（12 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）及U01
【基金项目】
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甘肃省自然科学基金（No:20JR5RA146）；
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目的 观察异丙酚通过缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/细胞外调节激酶（ERK）通路对缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤的影响。方法 新生SD大鼠离体培养原代海马神经元细胞，随机分为6组。对照组（高糖DMEM培养液）、缺氧组（低糖DMEM培养液）、LP组（3 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）、MP组（6 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）、HP组（12 mg/L异丙酚的低糖DMEM培养液）及U0126组（终浓度12 mg/L异丙酚+50μmol/L U0126的低糖DMEM培养液）。缺氧组、LP组、MP组、HP组及U0126组于缺氧条件培养24 h；对照组于有氧条件培养24 h。透射电镜观察各组海马神经元细胞形态；MTT法检测细胞存活率；激光共聚焦显微镜检测Ca2+、活性氧（ROS）的荧光强度；酶联免疫吸附试验检测细胞钙调神经磷酸酶（GaN）活性；Western blotting检测HIF-1α、ERK1/2、p-ERK1/2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白表达。结果 缺氧组线粒体损伤严重，LP、MP和HP组线粒体损伤均有所减轻，HP组减轻最为明显，U0126组线粒体损伤较HP组严重。与缺氧组海马神经元细胞存活率（42.30±3.64）%比较，MP组（59.54±5.19）%、HP组（70.81±6.47）%及U0126组（53.08±5.61）%均升高，且HP组高于MP组和U0126组（P＜0.05）。与缺氧组Ca2+、ROS荧光强度[（0.107±0.004）、（0.087±0.003）]比较，LP组ROS荧光强度（0.078±0.003）及MP组、HP组及U0126组Ca2+荧光强度[（0.085±0.003）、（0.067±0.002）、（0.090±0.003）]、ROS荧光强度[（0.060±0.002）、（0.051±0.005）、（0.076±0.003）]均降低（P＜0.05）,HP组低于MP组和U0126组（P＜0.05）。与缺氧组GaN活性（0.61±0.05）u/mg比较，MP组、HP组及U0126组[（0.50±0.05）u/mg、（0.37±0.04）u/mg、（0.54±0.04）u/mg]降低，且HP组低于MP组和U0126组（P＜0.05）。与缺氧组比较，LP组、MP组、HP组及U0126组HIF-1α、p-ERK1/2蛋白相对表达量升高，且HP组高于LP组、MP组和U0126组（P＜0.05）；与缺氧组比较，LP组、MP组、HP组及U0126组Caspase-3蛋白相对表达量降低，且HP组低于LP组、MP组和U0126组（P＜0.05）。结论 异丙酚可减轻缺氧大鼠海马神经元线粒体损伤，其调控机制可能与HIF-1α/ERK通路有关。
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