【摘 要】
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目的:在体外条件下,探讨山奈酚对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)诱导人正常肝细胞株HL-7702细胞凋亡的保护作用以及机制.方法:通过ERS诱导剂衣霉素(tunicamyc
【机 构】
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山西医科大学第二临床医学院,首都医科大学附属北京佑安医院肝病研究所,首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目,No.81270532;中国肝炎防治基金会王宝恩肝纤维化研究基金资助项目,No.CFHPC20131031;首都临床特色应用研究基金资助项目,No.Z121107001012167~~
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目的:在体外条件下,探讨山奈酚对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)诱导人正常肝细胞株HL-7702细胞凋亡的保护作用以及机制.方法:通过ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)诱导HL-7702细胞发生凋亡,建立肝细胞损伤模型,以不同浓度的山奈酚干预HL-7702细胞.分别采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;采用MTT法检测细胞存活率;采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力定量测定试剂盒测定细胞上清液LDH活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;同时采用免疫印迹法检测ERS相关凋亡相关蛋白CHOP的表达情况.结果:与TM诱导的肝细胞凋亡组相比,低浓度山奈酚(0.01、0.10、1.00μmol/L)显著抑制ERS诱导的肝细胞凋亡,但随着浓度升高其保护作用减弱,包括改善细胞形态,增加肝细胞的存活率(TM模型组80.14%±8.00%,不同浓度山奈酚干预组分别为96.16%±10.00%,P<0.01;91.43%±9.10%,P<0.01;87.84%±6.90%,P<0.01),减少了H L-7702细胞释放LDH(TM模型组398.5 U±30.8 U,不同浓度山奈酚干预组分别为89.9 U±21.4U,P<0.05;95.1 U±8.9 U,P<0.05;120.5 U±24.2 U,P<0.05),减少HL-7702细胞的凋亡率(TM模型组4.58%±0.90%,不同浓度山奈酚干预组分别为1.18%±0.48%,P<0.05;1.9 7%±0.3 2%,P<0.0 5;2.6 3%±0.1 6%,P<0.05),并显著下调E R S特异性凋亡蛋白CHOP的表达.结论:低浓度山奈酚可能通过抑制CHOP的表达保护ERS诱导的肝细胞凋亡HL-7702细胞,因此应用山奈酚可能为肝病所引发的肝损伤提供新的干预措施.
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