【摘 要】
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目的以咪达唑仑为探针药用HPLC法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶活性。方法用ZORBAX SB-C18色谱柱分离;流动相为乙腈-水-0.1%三氟乙酸;流速为1 mL.min-1;柱温40℃;检测波长为230 nm
【机 构】
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河南科技大学医学院; 温州医学院药学院;
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目的以咪达唑仑为探针药用HPLC法测定大鼠肝微粒体CYP3A酶活性。方法用ZORBAX SB-C18色谱柱分离;流动相为乙腈-水-0.1%三氟乙酸;流速为1 mL.min-1;柱温40℃;检测波长为230 nm。肝微粒体加入咪达唑仑孵育5 min后,用乙腈终止反应,加入内标溶液50μL,混匀后离心10 min,取上清进行HPLC分析;计算Km和Vmax。结果 1-羟基咪达唑仑浓度在0.06～3.00 mg.L-1内线性关系良好;日内、日间精密度均<10%,回收率>75%。咪达唑仑羟化反应的Km=7.32μmol.L-1,Vmax=0.59 nmol.min-1.mg-1pro。结论本方法稳定可靠,能准确反映CYP3 A酶的活性。
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