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摘要：目的评价补肾活血汤对老龄自发性高血压大鼠（SHR）炎症因子、白细胞介素—6及血清胱抑素C的影响。方法实验动物选取18月龄SHR大鼠48只，按随机数字表法将SHR随机分成4组，每组12只，分别为补肾活血汤组、卡托普利组、补肾活血汤+卡托普利组、模型对照组，分别给予相应药物及蒸馏水灌胃，每天1次，另选12只18月龄Wistar大鼠作为空白对照组，观察治疗前后血压、血清C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、血清胱抑素C（CysC）水平。结果5组实验资料的比较，实验高血压大鼠SHR加用补肾活血汤组的血压有明显改善，CRP、IL-6、CysC水平明显低于其他组别，有极显著性差异（P<0.01）。结论补肾活血汤能有效降低SHR大鼠的收缩压，降低血清 CRP、IL-6、CysC水平。
关键词：高血压；C反应蛋白；白细胞介素-6；血清胱抑素；大鼠
中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）09-0068-03
【Abstract】Objective： To evaluate the effect of Bushen Huoxue Decoction on inflammatory factors， interleukin-6 and serum cystatin C in aged spontaneously hypertensive rats （SHR）. Methods： 48 18-month-old SHR rats were divided into 4 groups by random number table， 12 rats per group， i.e. Bushen Huoxue Decoction， Captopril， Bushen Huoxue Decoction plus Captopril and model control groups. The rats were respectively given intragastric administration with corresponding drugs and distilled water， once a day. Other 18-month-old Wistar rats were used as a blank control group to observe the effects of blood pressure， serum C-reactive protein （CRP）， serum C-reactive protein （CRP）， Interleukin-6 （IL-6）， serum cystatin C （CysC） levels before and after treatment. Results： Compared with the experimental data， the blood pressure of the experimental rats was significantly improved， and the levels of CRP， IL-6 and CysC were significantly lower than those of the other groups （P<0.01）. The difference had statistical significance. Conclusion： Bushen Huoxue Decoction can effectively reduce the systolic blood pressure of SHR rats and decrease the levels of serum CRP， IL-6 and CysC of SHR rats.
【Key words】hypertension， C-reactive protein， interleukin-6， serum cystatin， rats我国已进入老龄化社会，老年人的慢性病中以高血压的发病率最高[1]，是导致老年人致残和死亡的主要原因，因此，研究老年性高血压的防治有重大的意义。多项研究证实炎症在高血压病的发生发展和靶器官的损伤过程中发挥重要作用，近年的研究提示胱抑素C与高血压的发生、发展和预后也密切相关[2]。本研究旨在观察补肾活血汤对老龄自发性高血压大鼠炎症因子及白细胞介素-6的影响，探讨该方治疗老年原发性高血压的作用机制，报道如下。
1资料与方法
1.1药品补肾活血汤的组方如下：生地黄12 g，山茱萸15 g，制何首乌15 g，杜仲12 g，怀牛膝15 g，泽泻15 g，当归12 g，石决明15 g，天麻15 g，川芎12 g，益母草30 g，泽兰15 g，由黄岛区第二中医院中药制剂室准备，质量标准参照2006版《药典》规定，卡托普利片，每片25 mg，由山东齐鲁制药有限公司生产。
1.2实验方法
1.2.1实验动物18月龄的SHR大鼠48只，雌雄各半，购于北京维通利华实验动物有限公司，18月龄Wistar大鼠12只，雌雄各半，购于青岛市药物检验研究所。雌雄分笼，标准饲料喂养，恒温（25±2）℃，恒濕（65±5）%。
1.2.2分组及处理按随机数字表法将48只SHR大鼠随机分成4组，每组12只，分别为补肾活血汤组、卡托普利组、补肾活血汤+卡托普利组（两药联用组）、模型对照组。12只Wistar大鼠为正常对照组，正常对照组和模型对照组给予蒸馏水，补肾活血汤组给予水煎液10 mL/kg（含生药0.63 g/mL），卡托普利组给予卡托普利悬浊液10 mL/kg（含卡托普利3.5 mg/mL），补肾活血汤+卡托普利组给予补肾活血汤0.63 g/mk+卡托普利3.5 mg/mL，两药混合或悬浊液配。各组均灌胃给药，每天1次。连续给药8周。 1.3检测指标及方法
1.3.1尾动脉血压测量各组大鼠采用RBP-1型大鼠尾压心率测定仪，通过尾袖法间接测定大鼠安静清醒状态下尾动脉收缩压并记录，测3次，取其均值作为该大鼠的收缩压，设定专人规范化定时测定，将测定的误差减到最小。定于给药前、药后1周末、药后2周末、药后4周末、8周末各测血压1次。
1.3.2血清CRP、IL-6、CysC检测各组大鼠于最后1次给药后，禁食12 h，用10%水合氯醛（0.2 mL/kg）经腹腔注射麻醉大鼠，腹部正中切口，腹主动脉取血约5 mL，3500 r/min离心10 min，取上清液置于-20℃低温下冷冻备用。严格按照试剂盒说明的操作歩骤，测定CRP、IL-6、CysC含量。
1.4统计学处理方法采用SPSS17.0软件包处理，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，入组前SHR组间均衡性检验用方差分析，两组间用t检验，多组间用单因素方差分析（one-way ANOVA），P<0.05为差异有统计学意义，P<0.01为差异有显著统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠用药前后收缩压的变化情况治疗前与空白对照组比较SHR各组收缩压明显提高，差异有显著统计学意义（P<0.01）；治疗后与模型对照组比较，各治疗组收缩压均有所降低，差异有统计学意义（P<0.05）；其中两药联用组最低（P<0.01），与卡托普利组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。实验结果见表1。
2.2对CRP、IL-6、CysC的影响比较（1）各组大鼠血清CRP：模型对照组较空白对照组显著升高（P<0.01），各治疗组较模型对照组均降低（P<0.01），其中两药联用组最低，与空白对照组比较无明显差异（P>0.05）。（2）各组大鼠血清IL-6：模型对照组较空白对照组显著升高（P<0.01），各治疗组较模型对照组均降低（P<0.01），其中补肾活血汤组最低，与卡托普利组比较有明显差异（P<0.05），与两药联用组比较则无明显差异（P>0.05）。（3）各组大鼠血清CysC：模型对照组较空白对照组显著下降（P<0.01），补肾活血汤和两药联用组较模型对照组显著升高（P<0.01），卡托普利组较模型对照组比较无明显差异（P>0.05）。实验结果见表2。
3讨论
流行病学资料显示血压水平随年龄增加而增加，高血压在老年人中的发病率很高，是导致老年人充血性心力衰竭、脑卒中、冠心病、肾功能衰竭、主动脉疾病的发病率和病死率升高的主要原因[3]。Virchow第1次提出了炎症在高血压形成和发展中的致病假说[4]。使炎症与高血压间的相关性越来越受到重视，尤其是CRP、IL-6。CRP可以上调血管紧张素受体、促进血管内皮表达 PAI-1，从而导致血压升高，CRP 可通过糖脂代谢间接影响血压。此外，Pravenec 等报道，CRP升高能直接促使高血糖、腹型肥胖等多种临床特征发生，因此 CRP 可能通过代谢紊乱多种临床特征的形成，参与了高血压的发生。IL-6 升高使平滑肌细胞内的Ca2+呈快速的升高，引起血管收缩，导致周围血管阻力增高，影响机体血压水平[5]。另一方面在 IL-6 的刺激下可由肝脏合成大量的 CRP，与脂蛋白结合，由经典途径激活补体系统，继而产生大量终末复合物和终末蛋白，造成血管内膜受损，从而参与血管的炎症过程，导致循环阻力升高，最终导致高血压[6]。
老年性高血压源自中医“眩晕”、“头痛”、“耳鸣”、“中风”等范畴中。《灵枢·海论》篇有“髓海不足导致脑转耳鸣，胫酸眩冒”。《医宗金鉴》有“瘀血停滞，神迷眩晕”的观点，《景岳全书·眩晕》篇中指出：“眩晕一证，虚者居其八九，……”。强调指出“无虚不能作眩[8]。”肾为先天之本，主藏精生髓，脑为髓之海。若年高肾精亏虚，髓海不足，无以充盈于脑；或体虚多病，损伤肾精肾气；或房劳过度，阴精亏虚，均可导致髓海空虚，髓海空虚导致肾阴素亏，水不涵木，肝阳上亢，肝风内动，亦可发为眩晕[9]。并且多数老年人高血压病患者病久迁延难愈，也符合“病久及肾”的理论。肾虚阳气不足，温煦推动血行无力，血行迟缓，瘀血阻滞络脉；肾虚阴精亏少，血脉失濡，肠道枯涩，血行不畅，都可使脑窍失养而眩晕频作。瘀血内阻可影响津液输布，瘀血与血黏度、血液流变及微循环等密切相关，血脉瘀滞而出现津液凝聚为痰，痰瘀互结为患，蕴久而化毒，损伤心络，引起血管内皮微炎症及损伤，加重了高血压的危害。正如《读医随笔》所说“阳虚血必凝，阴虚血必滞”。临床所见，老年性高血压病人多伴头痛麻木，胸悶胸痛，口唇紫绀，舌有瘀点瘀斑等血瘀征象，故肾虚血瘀是老年性高血压发生发展的重要机制，贯穿老年性高血压的整个过程。所以本实验选用18个月的老龄大鼠，采用补肾活血专方，现代药理研究也表明，上述诸药均有较好的降压作用。牛膝：具有降压、保护血管内皮的作用，同时可降低血液流变学的相关指标，使血黏度显著下降，对正常大鼠均有降低作用；益母草：其主要成分为益母草水苏碱，益母草水苏碱可明显提高冠状动脉血流量，减少心肌细胞的坏死，降低血管阻力，改善微循环，减慢心率，减少心输出量，对血管壁有直接扩张作用[10]。实验结果显示，补肾活血法能有效降低老龄SHR大鼠的收缩压，降低血清CRP、IL-6、CysC水平，改善临床症状，能为中西医结合防治老年性高血压病提供思路。
参考文献：
[1]张健.中国老年卫生服务指南[M].北京：华夏出版社.2004：7.
[2]Bogdansk iP，Ku jaw ska-Lu czakM，Lack i J，et a.l E valu at ion of selectedin terleuk in s，tum or n ecros is factor，in su lin and lep tin in ob ese patien tsw ith hyperten sion[J].PolM erku r Lekarsk，2003，15（88）：347-351.
[3]单立新.血清胱抑素 C 测定的临床意义及方法学进展[J].吉林医学，2011，32（6）：1195-1196.
[4]罗蓉，周怡，李洪涛.老年高血压病患者血清、白介素-6 和C-反应蛋白水平的变化研究[J].实用心脑肺血管病杂志2012，20（1）：74.
[5]Bautista L E，Lopez-Jaramillo P，Vera L M，et al.Is C-reactiveprotein an independent risk factor for essential hypertension[J].JH ypertens，2001，19（7）：857-861.
关键词：高血压；C反应蛋白；白细胞介素-6；血清胱抑素；大鼠
中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）09-0068-03
【Abstract】Objective： To evaluate the effect of Bushen Huoxue Decoction on inflammatory factors， interleukin-6 and serum cystatin C in aged spontaneously hypertensive rats （SHR）. Methods： 48 18-month-old SHR rats were divided into 4 groups by random number table， 12 rats per group， i.e. Bushen Huoxue Decoction， Captopril， Bushen Huoxue Decoction plus Captopril and model control groups. The rats were respectively given intragastric administration with corresponding drugs and distilled water， once a day. Other 18-month-old Wistar rats were used as a blank control group to observe the effects of blood pressure， serum C-reactive protein （CRP）， serum C-reactive protein （CRP）， Interleukin-6 （IL-6）， serum cystatin C （CysC） levels before and after treatment. Results： Compared with the experimental data， the blood pressure of the experimental rats was significantly improved， and the levels of CRP， IL-6 and CysC were significantly lower than those of the other groups （P<0.01）. The difference had statistical significance. Conclusion： Bushen Huoxue Decoction can effectively reduce the systolic blood pressure of SHR rats and decrease the levels of serum CRP， IL-6 and CysC of SHR rats.
【Key words】hypertension， C-reactive protein， interleukin-6， serum cystatin， rats我国已进入老龄化社会，老年人的慢性病中以高血压的发病率最高[1]，是导致老年人致残和死亡的主要原因，因此，研究老年性高血压的防治有重大的意义。多项研究证实炎症在高血压病的发生发展和靶器官的损伤过程中发挥重要作用，近年的研究提示胱抑素C与高血压的发生、发展和预后也密切相关[2]。本研究旨在观察补肾活血汤对老龄自发性高血压大鼠炎症因子及白细胞介素-6的影响，探讨该方治疗老年原发性高血压的作用机制，报道如下。
1资料与方法
1.1药品补肾活血汤的组方如下：生地黄12 g，山茱萸15 g，制何首乌15 g，杜仲12 g，怀牛膝15 g，泽泻15 g，当归12 g，石决明15 g，天麻15 g，川芎12 g，益母草30 g，泽兰15 g，由黄岛区第二中医院中药制剂室准备，质量标准参照2006版《药典》规定，卡托普利片，每片25 mg，由山东齐鲁制药有限公司生产。
1.2实验方法
1.2.1实验动物18月龄的SHR大鼠48只，雌雄各半，购于北京维通利华实验动物有限公司，18月龄Wistar大鼠12只，雌雄各半，购于青岛市药物检验研究所。雌雄分笼，标准饲料喂养，恒温（25±2）℃，恒濕（65±5）%。
1.2.2分组及处理按随机数字表法将48只SHR大鼠随机分成4组，每组12只，分别为补肾活血汤组、卡托普利组、补肾活血汤+卡托普利组（两药联用组）、模型对照组。12只Wistar大鼠为正常对照组，正常对照组和模型对照组给予蒸馏水，补肾活血汤组给予水煎液10 mL/kg（含生药0.63 g/mL），卡托普利组给予卡托普利悬浊液10 mL/kg（含卡托普利3.5 mg/mL），补肾活血汤+卡托普利组给予补肾活血汤0.63 g/mk+卡托普利3.5 mg/mL，两药混合或悬浊液配。各组均灌胃给药，每天1次。连续给药8周。 1.3检测指标及方法
1.3.1尾动脉血压测量各组大鼠采用RBP-1型大鼠尾压心率测定仪，通过尾袖法间接测定大鼠安静清醒状态下尾动脉收缩压并记录，测3次，取其均值作为该大鼠的收缩压，设定专人规范化定时测定，将测定的误差减到最小。定于给药前、药后1周末、药后2周末、药后4周末、8周末各测血压1次。
1.3.2血清CRP、IL-6、CysC检测各组大鼠于最后1次给药后，禁食12 h，用10%水合氯醛（0.2 mL/kg）经腹腔注射麻醉大鼠，腹部正中切口，腹主动脉取血约5 mL，3500 r/min离心10 min，取上清液置于-20℃低温下冷冻备用。严格按照试剂盒说明的操作歩骤，测定CRP、IL-6、CysC含量。
1.4统计学处理方法采用SPSS17.0软件包处理，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，入组前SHR组间均衡性检验用方差分析，两组间用t检验，多组间用单因素方差分析（one-way ANOVA），P<0.05为差异有统计学意义，P<0.01为差异有显著统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠用药前后收缩压的变化情况治疗前与空白对照组比较SHR各组收缩压明显提高，差异有显著统计学意义（P<0.01）；治疗后与模型对照组比较，各治疗组收缩压均有所降低，差异有统计学意义（P<0.05）；其中两药联用组最低（P<0.01），与卡托普利组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。实验结果见表1。
2.2对CRP、IL-6、CysC的影响比较（1）各组大鼠血清CRP：模型对照组较空白对照组显著升高（P<0.01），各治疗组较模型对照组均降低（P<0.01），其中两药联用组最低，与空白对照组比较无明显差异（P>0.05）。（2）各组大鼠血清IL-6：模型对照组较空白对照组显著升高（P<0.01），各治疗组较模型对照组均降低（P<0.01），其中补肾活血汤组最低，与卡托普利组比较有明显差异（P<0.05），与两药联用组比较则无明显差异（P>0.05）。（3）各组大鼠血清CysC：模型对照组较空白对照组显著下降（P<0.01），补肾活血汤和两药联用组较模型对照组显著升高（P<0.01），卡托普利组较模型对照组比较无明显差异（P>0.05）。实验结果见表2。
3讨论
流行病学资料显示血压水平随年龄增加而增加，高血压在老年人中的发病率很高，是导致老年人充血性心力衰竭、脑卒中、冠心病、肾功能衰竭、主动脉疾病的发病率和病死率升高的主要原因[3]。Virchow第1次提出了炎症在高血压形成和发展中的致病假说[4]。使炎症与高血压间的相关性越来越受到重视，尤其是CRP、IL-6。CRP可以上调血管紧张素受体、促进血管内皮表达 PAI-1，从而导致血压升高，CRP 可通过糖脂代谢间接影响血压。此外，Pravenec 等报道，CRP升高能直接促使高血糖、腹型肥胖等多种临床特征发生，因此 CRP 可能通过代谢紊乱多种临床特征的形成，参与了高血压的发生。IL-6 升高使平滑肌细胞内的Ca2+呈快速的升高，引起血管收缩，导致周围血管阻力增高，影响机体血压水平[5]。另一方面在 IL-6 的刺激下可由肝脏合成大量的 CRP，与脂蛋白结合，由经典途径激活补体系统，继而产生大量终末复合物和终末蛋白，造成血管内膜受损，从而参与血管的炎症过程，导致循环阻力升高，最终导致高血压[6]。
老年性高血压源自中医“眩晕”、“头痛”、“耳鸣”、“中风”等范畴中。《灵枢·海论》篇有“髓海不足导致脑转耳鸣，胫酸眩冒”。《医宗金鉴》有“瘀血停滞，神迷眩晕”的观点，《景岳全书·眩晕》篇中指出：“眩晕一证，虚者居其八九，……”。强调指出“无虚不能作眩[8]。”肾为先天之本，主藏精生髓，脑为髓之海。若年高肾精亏虚，髓海不足，无以充盈于脑；或体虚多病，损伤肾精肾气；或房劳过度，阴精亏虚，均可导致髓海空虚，髓海空虚导致肾阴素亏，水不涵木，肝阳上亢，肝风内动，亦可发为眩晕[9]。并且多数老年人高血压病患者病久迁延难愈，也符合“病久及肾”的理论。肾虚阳气不足，温煦推动血行无力，血行迟缓，瘀血阻滞络脉；肾虚阴精亏少，血脉失濡，肠道枯涩，血行不畅，都可使脑窍失养而眩晕频作。瘀血内阻可影响津液输布，瘀血与血黏度、血液流变及微循环等密切相关，血脉瘀滞而出现津液凝聚为痰，痰瘀互结为患，蕴久而化毒，损伤心络，引起血管内皮微炎症及损伤，加重了高血压的危害。正如《读医随笔》所说“阳虚血必凝，阴虚血必滞”。临床所见，老年性高血压病人多伴头痛麻木，胸悶胸痛，口唇紫绀，舌有瘀点瘀斑等血瘀征象，故肾虚血瘀是老年性高血压发生发展的重要机制，贯穿老年性高血压的整个过程。所以本实验选用18个月的老龄大鼠，采用补肾活血专方，现代药理研究也表明，上述诸药均有较好的降压作用。牛膝：具有降压、保护血管内皮的作用，同时可降低血液流变学的相关指标，使血黏度显著下降，对正常大鼠均有降低作用；益母草：其主要成分为益母草水苏碱，益母草水苏碱可明显提高冠状动脉血流量，减少心肌细胞的坏死，降低血管阻力，改善微循环，减慢心率，减少心输出量，对血管壁有直接扩张作用[10]。实验结果显示，补肾活血法能有效降低老龄SHR大鼠的收缩压，降低血清CRP、IL-6、CysC水平，改善临床症状，能为中西医结合防治老年性高血压病提供思路。
参考文献：
[1]张健.中国老年卫生服务指南[M].北京：华夏出版社.2004：7.
[2]Bogdansk iP，Ku jaw ska-Lu czakM，Lack i J，et a.l E valu at ion of selectedin terleuk in s，tum or n ecros is factor，in su lin and lep tin in ob ese patien tsw ith hyperten sion[J].PolM erku r Lekarsk，2003，15（88）：347-351.
[3]单立新.血清胱抑素 C 测定的临床意义及方法学进展[J].吉林医学，2011，32（6）：1195-1196.
[4]罗蓉，周怡，李洪涛.老年高血压病患者血清、白介素-6 和C-反应蛋白水平的变化研究[J].实用心脑肺血管病杂志2012，20（1）：74.
[5]Bautista L E，Lopez-Jaramillo P，Vera L M，et al.Is C-reactiveprotein an independent risk factor for essential hypertension[J].JH ypertens，2001，19（7）：857-861.