粉尘螨第7类变应原(Derf7)基因的克隆表达及免疫学特性鉴定

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangyanb
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目的克隆和表达粉尘螨第7类变应原基因,并鉴定重组蛋白的免疫原性。方法提取粉尘螨总RNA,根据GenBank提供的Derf7编码区(CDS)(登录号为AY283292)序列设计特异性引物,逆转录PCR(RT—PCR)克隆Derf7基因。将测序正确的目的片段克隆至pET-32a表达载体.得到的重组质粒pET-32a.Derf7在大肠埃希菌(Ecoli)BL21(DE3)中用异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍离子亲和层析纯化目的蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)检
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