目的:建立高效液相色谱法测定犬血浆中单硝酸异山梨酯(5-isosorbide mononitrate)浓度,研究单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂犬鼻腔给药后体内药动学行为。方法:采用双周期双交叉试验设计方法,6只Beagle犬随机单剂量施用单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂或灌胃片剂均20mg,用高效液相色谱法测定给药后的血浆中单硝酸异山梨酯浓度。采用DAS2.0统计软件计算单硝酸异山梨酯主要药动学参数及其相对生物利用度。结果:线性范围为50～2500μg·L-1,日内、日间RSD均小于10%。提取回收率为81.63%～90.21%,方法回收率为85.56%～97.11%。单硝酸异山梨酯鼻腔喷雾剂的相对生物利用度(F0→t)为(93.86±74.12)%。结论:该法准确、灵敏,适用于单硝酸异山梨酯血浆浓度的测定。与单硝酸异山梨酯片剂相比,鼻腔喷雾剂具有更快的吸收和更高的达峰浓度。