【摘 要】
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为监测猪场猪群中猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）抗体水平,本研究利用TGEV冻存液,通过RT-PCR扩增得到S基因的主要抗原片段B/C区约560bp,将其酶切后连接到pET-32a载体,转化大肠杆菌BL
【机 构】
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南沙出入境检验检疫局,华南农业大学兽医学院
【基金项目】
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广东省省级科技计划项目（20158020230009）
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为监测猪场猪群中猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）抗体水平,本研究利用TGEV冻存液,通过RT-PCR扩增得到S基因的主要抗原片段B/C区约560bp,将其酶切后连接到pET-32a载体,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。挑取转化成功的部分菌落进行PCR试验,将目的条带正确的菌落添加到LB培养基过夜培养,提取重组质粒并送测序。培养测序正确的菌液,利用IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE试验,在约37ku位置有一明显的目的条带。利用自制猪传染性胃肠炎兔血清通过Western blotting试验检测纯化的重
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