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目的
应用实时荧光定量PCR建立鼠疫快速特异基因诊断技术。
方法针对4条鼠疫菌染色体上DNA标识基因(YPO0392、YPO1094、YPO2087、YPO2090),设计特异探针及引物,应用实时荧光定量PCR法对不同来源的40株云南疫源地鼠疫菌及47株其他细菌,进行稳定及特异性试验。应用筛选出的探针及引物,对来源于云南玉龙8份鼠疫DNA阳性样本进行应用评价。
结果①筛选出2组特异的DNA探针及引物,标识序列为YPO0392和YPO1094;②应用筛选出的2组探针及引物对8份鼠疫DNA阳性样本进行检测,结果均为阳性。
结论筛选出鼠疫菌YPO0392和YPO1094序列引物及探针,成功建立应用实时荧光定量PCR快速特异性诊断鼠疫技术。