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稳定、可靠和快速的牛胚胎性别鉴定方法在生产应用中具有重要意义。通过两温度梯度PCR方法对牛基因组、克隆胚胎、胚胎样品进行性别鉴别实验研究，建立了稳定、简便、快速的牛早期胚胎性别鉴别两温度梯度PCR方法，鉴定时间仅为57分钟。采用两温度梯度PCR方法对30枚奶牛胚胎进行了早期性别鉴别，并将鉴别的15枚胚胎（11枚为雌性，4枚为雄性）移植到同期处理的15头受体母牛体内。60天后妊娠检查，有7个受体成功受孕，5头受体怀孕晚期流产，流产犊牛全部为母犊。结果产下1公1母两头犊牛，流产个体与出生个体的性别与PCR鉴别