狂犬病“靶向性”中和表位DNA疫苗的构建与瞬时表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：inspisee1999

【摘要】

：

采用RT—PCR获得BALB／c小鼠P41基因，并在不影响氨基酸序列前提下，对序列中461ntNcoI酶切位点进行定点突变；然后采用定向克隆方法将狂犬病病毒糖蛋白主要中和抗原表位核苷酸序列替

【作者】

：

肖跃强谢金文李书光魏凤丁壮刘吉山沈志强

【机构】

：

山东省滨州畜牧兽医研究院,山东绿都生物科技有限公司,吉林大学动物医学学院

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2013年7期

【关键词】

：

狂犬病病毒中和表位 BALB c小鼠恒定链定点突变定向克隆瞬时表达 neutralization epitopes of rabies virus BA

【基金项目】

：

山东省青年自然科学基金资助项目（Q2008D04）

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

采用RT—PCR获得BALB／c小鼠P41基因，并在不影响氨基酸序列前提下，对序列中461ntNcoI酶切位点进行定点突变；然后采用定向克隆方法将狂犬病病毒糖蛋白主要中和抗原表位核苷酸序列替换P41序列中CLIP区域，进行新一轮PCR反应以获得带有Kozak调控序列的P41一N分子，以增加目的基因的表达量，并将该含有Kozak序列的P41-N分子克隆插入到真核表达载体pCI-neo多克隆位点，通过PCR与限制性内切酶酶切方法进行鉴定；最后将各中和表位表达载体转染COs-7细胞，Westernblottin

其他文献

茶多酚抗柔嫩艾美尔球虫的效果及作用机制

根据鸡球虫病的特点，研究不同浓度水平的茶多酚（teapolyphenol）对未孢子化以及完全孢子化Emeriatenella球虫卵囊的作用效果；并通过在基础日粮中添加0．02％、0．04％和0．06％不同浓度水平茶

期刊

茶多酚抗球虫机制TP anti-coccidian mechanism

嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统ascV全长基因的克隆及其在不同菌株中的分布

根据已发表的嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统（TTSS）的ascV基因保守区核苷酸序列设计合成1对引物，以国内疫苗菌株J-1的基因组为模板，通过PCR扩增得到331bp保守基因片段，将目的片段进行测

期刊

嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统ascV基因序列分析分布Aerorn onas hydrophila type III secretion system

大肠杆菌O157：H7候选效应蛋白Z1370的原核表达、纯化及多抗制备

为鉴定肠出血性大肠杆菌O157：H7的效应蛋白，本研究利用生物信息学方法预测了1个新的大肠杆菌O157：H7分泌蛋白Z1370，并以EDL933菌株为模板，扩增Z1370基因。将该基因克隆至原核表达

期刊

肠出血性大肠杆菌O157:H7Z1370分泌蛋白多克隆抗体原核表达enterohemorrhagic Escherichia coli （EHEC）

鸡传染性支气管炎病毒地方分离株核蛋白基因的遗传变异分析

对2006-2009年从山西各地疑似传染性支气管炎的病例中分离到的7株IBV地方分离株的核蛋白基因片段进行序列测定及分析。结果发现,7株IBV地方分离株核蛋白基因有5株含有一个长1

期刊

传染性支气管炎病毒N蛋白基因遗传变异infectious bronchitis virus nucleocapsid gene phylogeneti

雏鸡肠组织中CD44的鉴定及时空表达特性

为了解CD44分子在雏鸡肠组织内的表达及其时空表达特性,设计1对引物,建立RT-PCR方法对CD44mRNA进行鉴定;以GAPDH基因为内参,建立检测鸡CD44基因表达水平的SYBR GreenⅠ实时荧

期刊

雏鸡CD44SYBRGreenI荧光定量PCRchicken CD44 SYBR Green I Q-PCR

豆状带绦虫六钩蚴Tp-dUTPase基因的表达及血清学诊断效果

采用PCR方法从豆状带绦虫六钩蚴中扩增得到Tp-dUTPase基因编码区,构建了pET32a-Tp-dUTPase原核表达载体,以重组蛋白dUTPase作为包被抗原建立的兔豆状囊尾蚴病Dot-ELISA诊断方

期刊

豆状带绦虫Tp-dUTPase免疫诊断DOT-ELISATaenia pisiformis Tp-dUTPase gene immune diagn

Toll样受体2（TLR2）参与猪链球菌诱导的自噬作用

为证实Toll样受体2（TLR2）是否参与2型猪链球菌诱导的细胞自噬作用，通过阻断TLR2，并建立2型猪链球菌感染J774A．1细胞模型，分别应用荧光定量PCR分析不同处理组细胞TLR2和NF—κBmRNA

期刊

TOLL样受体22型猪链球菌巨噬细胞自噬Toll-like receptor Streptococcus suis type 2 macroph

1型鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因（p25）的克隆表达及免疫学活性

为探讨1型鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）p25蛋白的免疫原性,从RA1型基因组DNA中扩增出p25基因全长ORF,生物信息学分析显示其为含有完整保守结构域PRK00110的一

期刊

鸭疫里默氏杆菌p25蛋白基因原核表达免疫原性Riemerella anatipestifer p25 protein gene prokaryoti

髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCGS-1的分离鉴定及前病毒cDNA重组质粒的构建

为分析髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒（ALV-J）地方分离毒株的分子特征及开展该病毒的反向遗传操作研究，本试验从四川某肉种鸡场髓细胞瘤病变病鸡的组织中分离到1株髓细胞瘤型ALV-J

期刊

髓细胞瘤ALV—J肉鸡myeloid leukosis subgroup J avian leukosis virus chicken

猪PLE1基因启动子克隆及序列分析

通过巢式PCR方法获得猪PI。E1基因5’端上游启动子序列，通过T／A克隆法对PI。E1基因的启动子进行克隆，并对PCR鉴定为阳性的克隆子进行测序，参考人、啮齿类的羧酸酯酶家族的启动子

期刊

猪PLE1基因启动子转录因子porcine PLE1 gene promoter transcription factor

狂犬病“靶向性”中和表位DNA疫苗的构建与瞬时表达

与本文相关的学术论文