藏红花素预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及TLR4/MyD88通路的影响

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目的 探讨藏红花素(Crocin)预处理给药对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及对Toll样受体4(TOLL-like re-ceptor4,TLR4)/髓样分化因子(Myeloid differentiation factor88,MyD88)信号通路的影响.方法 实验一:使用雄性SD大鼠30只,体重190~210g,随机分为5组,采用阻断大鼠肠系膜上动脉建立大鼠肠缺血条件,缺血时间为1h,以再灌注时间分别为2、6、12、24、72h后,取大鼠小肠并通过HE染色并进行Chiu氏评分后统计分析.实验二:雄性SD大鼠24只,体重190~210g,采用随机数字表法分为4组(n =6):假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注模型组(I/R组)、溶剂对照组100mg/kg(Vehicle组)和藏红花素100mg/kg预处理给药组(Crocin组).再灌注6h时取大鼠小肠组织,光镜下观察病理学结果并进行Chiu评分.免疫组化法测定TLR4、TNF-α和IL-23蛋白表达,MPO、MDA、SOD试剂盒测定肠组织含量,Western blot法测定肠组织总蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、TLR4、MyD88、TNF-α蛋白的表达水平.结果 与I/R6h相比,I/R2h、12h、24h、72h组大鼠小肠黏膜Chui氏评分均比6h均低,差异有统计学意义(P<0.05).与Sham组相比,I/R组大鼠肠黏膜Chiu评分、肠组织MDA、MPO的含量升高,SOD含量降低,肠组织总蛋白Bax、Caspase-3、TLR4、MyD88、TNF-α的表达水平上调,Bcl-2蛋白表达水平下调,差异均有统计学意义(P <0.05),Crocin组与I/R组及Vehicle组相比,大鼠肠黏膜Chiu评分降、肠组织MDA、MPO的含量降低,SOD含量升高,肠组织总蛋白TLR4、MyD88、TNF-α、Bax、Caspase-3表达水平下调,Bcl-2蛋白表达水平上调差异均有统计学意义(P<0.05).结论 藏红花素预处理给药减轻大鼠肠缺血再灌注损伤的氧化应激及细胞凋亡机制可能与抑制TLR4/MyD88信号通路的激活有关.
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