高原鼢鼠血管内皮生长因子基因编码和mRNA的表达以及微血管密度:与其它鼠类的比较

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动物组织微血管密度(microvessel density,MVD)的大小与其对低氧的适应能力有关。为进一步探讨高原鼢鼠对严重低氧、高CO2洞道环境的适应机制,本文就高原鼢鼠脑组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA表达水平及MVD与其它鼠类进行了比较研究。提取高原鼢鼠肝组织中总RNA,应用RT-PCR方法获得VEGF cDNA,并对VEGF基因进行克隆、测序,获得VEGF基因编码区;从GenBank获得高原鼠兔(Ochotona curzniae)、大鼠(Rattus norvegi-cus)和小鼠(Mus musculus)VEGF cDNA编码区碱基序列,应用生物学分析软件对高原鼢鼠、高原鼠兔、大鼠和小鼠VEGF cDNA及其所编码蛋白的氨基酸同源性进行了比较;通过应用SYBR GreenΙ荧光定量法和免疫组织化学方法分别对高原鼢鼠、高原鼠兔和Sprague-Dawley(SD)大鼠脑组织中VEGF mRNA的表达水平及脑MVD进行测定。结果显示,高原鼢鼠VEGF基因的编码区为645bp,与高原鼠兔、大鼠和小鼠VEGF基因的同源性分别为92.1%、93.6%和93.8%。高原鼢鼠VEGF基因编码188个氨基酸,其中1~26氨基酸为信号肽。高原鼢鼠VEGF188与高原鼠兔VEGF189、大鼠和小鼠VEGF188氨基酸同源性分别为90.2%、94.9%和94.4%。高原鼢鼠脑组织中VEGF基因mRNA表达水平显著低于SD大鼠(P<0.05),而与高原鼠兔没有明显差异(P>0.05);高原鼢鼠、高原鼠兔、SD大鼠脑组织中MVD依次减小,且差异显著(P<0.05)。综上所述,高原鼢鼠通过提高脑组织中MVD增强对洞道低氧环境的适应能力,但是高原鼢鼠脑组织中VEGF基因mRNA表达水平相对SD大鼠较低,可能与其洞道中高浓度CO2对VEGF基因表达的抑制作用有关。
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