【摘 要】
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目的:研究阿尔泰金莲花总黄酮及其成分荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷(OGA)的抗炎作用.方法:以环氧合酶1/2(COX 1/2)及5-脂氧酶(5-LO)抑制剂筛选试剂盒检测阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2”-O-β-L-半乳糖苷对COX 1/2和5-LO的抑制作用;脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞建立炎症细胞模型,采用MTS法检测阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷对RAW264.7细胞活力的影响,Griess试剂检测一氧化氮(NO)的分泌量,用2 \',7\'
【机 构】
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新疆药物研究所维吾尔药重点实验室,乌鲁木齐830004
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目的:研究阿尔泰金莲花总黄酮及其成分荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷(OGA)的抗炎作用.方法:以环氧合酶1/2(COX 1/2)及5-脂氧酶(5-LO)抑制剂筛选试剂盒检测阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2”-O-β-L-半乳糖苷对COX 1/2和5-LO的抑制作用;脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞建立炎症细胞模型,采用MTS法检测阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷对RAW264.7细胞活力的影响,Griess试剂检测一氧化氮(NO)的分泌量,用2 \',7\'-氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)释放情况,ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和前列腺素E2(PGE2)的分泌量,RT-qPCR法测定炎症因子Tnfα、Il-1β和Il-6的mRNA表达.结果:阿尔泰金莲花总黄酮对COX-1、COX-2酶的半数抑制浓度分别106.66 μg/mL,6.94 μg/mL;荭草素2”-O-β-L-半乳糖苷对COX-1、COX-2的半数抑制浓度分别为140.34 μg/mL,5.01 μg/mL,阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷对5-LO无明显影响;阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2”-O-β-L-半乳糖苷在1.95 μg/mL~125 μg/mL条件下对RAW264.7细胞不产生毒性作用.与正常对照组比较,模型对照组细胞中NO、ROS、TNF-α、IL-6、MCP-1和PGE2含量显著升高(P<0.01),Tnfα、Il-1β和Il-6 mRNA表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,阿尔泰金莲花总黄酮和荭草素2“-O-β-L-半乳糖苷呈剂量依赖性地降低细胞中NO、ROS、TNF-α、IL-6、MCP-1和PGE2的分泌(P<0.05或P<0.01),下调Tnfα、Jl-1β和Il-6的mRNA表达(P<0.05或P<0.01).结论:阿尔泰金莲花总黄酮具有良好的抗炎作用,荭草素2”-O-β-L-半乳糖苷是其发挥抗炎作用的物质基础之一,其作用机制可能是通过抑制COX-2活性,减少RAW 264.7细胞NO、PGE2、MCP-1及炎性因子的分泌,下调Tnfα、Il-6、Il-1β mRNA的表达有关.
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