【摘 要】
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目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)诱导结肠癌细胞HT29自噬后对细胞迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法建立结肠癌细胞株HT-29对照组和RAPA处理的实验组;免疫荧光染色观
【机 构】
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山西医科大学汾阳学院医学检验系,山西省人民医院肾脏病分子诊断与治疗实验室
【基金项目】
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山西省科技厅青年基金资助项目(201601D021108),山西医科大学汾阳学院校级科研基金资助项目(2017C02),国家级大学生创新创业训练项目基金资助(2017532).
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目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)诱导结肠癌细胞HT29自噬后对细胞迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法建立结肠癌细胞株HT-29对照组和RAPA处理的实验组;免疫荧光染色观察细胞自噬现象;划痕实验分析HT29细胞迁移能力; q PCR检测RAPA处理组Snail-1、Snail-2、LEF-1、E-cadherin、N-cadherin mRNA表达水平; Western blot法检测微管相关蛋白LC3和P62表达水平。结果 RAPA处理后的结肠癌HT29细胞可观察到自噬。RAPA诱导自噬组HT29细胞迁移能力减弱(P <0. 01)。q PCR结果显示Snail-1、N-cadherin mRNA表达水平下降,E-cadherin mRNA表达水平升高,而Snail-2和LEF-1 mRNA表达无显著变化。RAPA处理组与对照组相比,微管相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著上调,微管相关蛋白P62降低。结论 RAPA可通过诱导结肠癌细胞HT29自噬从而抑制其迁移能力,RAPA主要通过调节转录因子Snail-1及其下游效应分子的表达来抑制HT29细胞的迁移。
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