生孢噬纤维粘菌基因文库的构建和纤维素酶基因的克隆

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将生孢噬纤维粘菌(SporocytophagaB29)染色体用PstI部分酶切后,连接到大肠杆菌(E.coli)质粒载体pUC8上,然后转化E.coliJM83,从而建立了B29的基因文库,并筛选一个含有内切葡聚糖纤维素酶(CMCase)的阳性克隆.从此阳性克隆中提取质粒再转化JM83,发现所有的氨苄青霉素抗性(Apr)转化子都具有CMCase酶活性,证明在大肠杆菌中克隆到一个B29的内切葡聚糖酶基因.
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