【摘 要】
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构建腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒,并在心肌细胞内进行表达.利用分子克隆技术,将腺病毒相关病毒(AAV)中的末端重复序列(ITR)插在pORF5-mIL-10质粒启动子的上游,构建pORF-A
【机 构】
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浙江大学医学院附属第一医院心胸外科
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构建腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒,并在心肌细胞内进行表达.利用分子克隆技术,将腺病毒相关病毒(AAV)中的末端重复序列(ITR)插在pORF5-mIL-10质粒启动子的上游,构建pORF-AAV-mIL-10质粒.在阳离子脂质体Lipofectin介导下,pORF5-mIL-10和pORF-AAV-mIL-10分别转染次代培养心肌细胞,TRIzol一步法提取总RNA,RT-PCR检测mIL-10的mRNA;ELISA检测培养细胞上清中mIL-10的表达.结果是用双酶切证实成功构建质粒,分别在转染2
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