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目的
研究来氟米特对高糖诱导的足细胞裂孔隔膜及细胞骨架的影响，并探讨其信号通路。
方法条件永生的人肾小球足细胞系分为正常糖组、甘露醇高渗透压对照组、高糖组、高糖+PDTC（pyrrolidine dithiocarbamate，为NF-κB通路特异性抑制剂）组及高糖+A771726（来氟米特活性代谢产物）组。Western印迹法测定足细胞NF-κBp65途径的活化即p- NF-κBp65/NF-κBp65比值， Western印迹法、反转录PCR测定NF-κBp65、TRPC6、nephrin在肾小球足细胞的表达。免疫荧光染色法检测足细胞骨架的变化。
结果（1）高糖刺激足细胞激活NF-κBp65信号通路，60 min时p-NF-κBp65蛋白表达比0 min时显著增加（1.20±0.04比0.79±0.02，P<0.01）；正常糖组和甘露醇高渗透压对照组仅有少量NF-κBp65活化；PDTC及A771726可明显抑制p-NF-κBp65表达（均P<0.05)，NF-κBp65 mRNA表达各组之间差异均无统计学意义（均P>0.05）。（2）高糖刺激足细胞激活NF-κBp65信号通路后，TRPC6 mRNA及蛋白表达较正常组高，nephrin mRNA及蛋白表达较正常组低;PDTC及A771726可抑制TRPC6高表达，使nephrin表达较高糖组高（均P<0.05）。（3）免疫荧光法检测高糖刺激足细胞72 h后可见细胞骨架蛋白微丝肌动蛋白紊乱及张力纤维消失。
结论来氟米特活性代谢产物A771726可通过阻断高糖诱导的NF-κBp65信号通路的活化对足细胞起保护作用。