干扰SET8抑制血管平滑肌细胞转分化的研究

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目的 探讨赖氨酸甲基转移酶SET8对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)向成骨样细胞分化的影响.方法 体外分离培养大鼠VSMCs,将VSMCs随机分为正常对照组(未转染)、空质粒组(转染NS-shRNA)、SET8-shRNA组.应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测SET8和调节成骨与软骨分化的关键转录因子RUNX2 mRNA和蛋白的表达水平;应用酶联免疫法检测碱性磷酸酶(ALP)活性.结果 SET8-shRNA可成功抑制VSMCs中SET8的表达;RT-PCR及Western blot结果显示,SET8-shRNA组RUNX2 mRNA和蛋白的表达较正常对照组和空质粒组明显下降(P<0.05).ALP活性测定结果显示,SET8-siRNA组ALP活性较正常对照组和空质粒组显著降低(P<0.05).结论 干扰SET8基因表达能够抑制大鼠VSMCs向成骨样细胞转分化.
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