兜兰ITS-PCR反应体系的建立及优化

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为优化兜兰ITS-PCR反应体系,以兜兰属植物为试材,用改进的CTAB法提取总DNA,并采用单因子试验设计,对影响兜兰DNAITS-PCR扩增反应的主要因素即TaqDNA聚合酶的用量、Mg^2+浓度、dNTP浓度、引物退火温度、模板DNA用量和引物浓度等进行优化研究,建立兜兰最佳ITS扩增反应体系。结果表明:最佳反应体系为25肚L体系中,添加10×PCR buffer 2.5μL、TaqDNA酶1.25U、Mg^2+1.5mmol/L、dNTP0.15mmol/L、引物0.6μmol/L和模板D
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