分泌型卷曲蛋白2和β-链蛋白对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gymc2009
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观察分泌型卷曲蛋白2(sFRP2)和β-链蛋白(β-catenin)对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

方法

构建包含sFRP2蛋白全长的pcDNA3.1质粒,进行质粒转染,使得sFRP2在HCT116细胞中的表达上调;通过Western blot实验检测转染后HCT116细胞中sFRP2的表达水平;行细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测sFRP2表达上调后对结直肠癌细胞增殖能力的影响;采用划痕实验,检测sFRP2表达上调后对结直肠癌细胞迁移能力的影响;通过Transwell实验,检测sFRP2表达上调后对直肠癌侵袭能力的影响。

结果

转染后sFRP2及β-catenin在胃癌细胞中的表达水平明显升高,sFRP2蛋白与β-肌动蛋白(β-actin)比值为0.62±0.03比0.21±0.02(t=25.430,P=0.001),β-catenin蛋白与β-actin比值为0.32±0.02比0.17±0.01(t=15.000,P=0.001),差异均有统计学意义;测量sFRP2转染组、对照组和空载质粒组在12、24、36、48、60 h的吸光度值,分别为0.213±0.015比0.215±0.018比0.218±0.012、0.345±0.053比0.351±0.041比0.362±0.038、0.382±0.058比0.413±0.051比0.433±0.048、0.441±0.079比0.503±0.033比0.534±0.053、0.482±0.034比0.594±0.045比0.628±0.062,sFRP2转染组与对照组及空载质粒组比较(12 h:t=0.016,P=0.988和t=0.041,P=0.970;24 h:t=0.155,P=0.884和t=0.452,P=0.675;36 h:t=0.695,P=0.525和t=1.173,P=0.306;48 h:t=1.254,P=0.278和t=1.693,P=0.166;60 h:t=3.440,P=0.026和t=3.576,P=0.023),细胞增殖速度明显减慢;以空白组0 h和48 h划痕两侧距离之差作为标准,空白组、空载质粒组、sFRP2转染组分别为1.00±0.00、0.91±0.06、0.61±0.04、sFRP2转染组划痕两侧距离比空白组、空载质粒组较远,迁移速度明显较慢(t=16.890,P=0.001和t=7.206,P=0.002);sFRP2转染组透膜(75.69±7.19)个,对照组透膜(195.39±8.68)个,sFRP2转染组透膜细胞数明显少于对照组(t=25.459,P=0.001),表明细胞侵袭能力显著下降。

结论

sFRP2的上调明显抑制了HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭。

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