【摘 要】
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目的 基于唾液中特异表达的mRNA标记分子,建立五重荧光复合检测系统,实现对唾液的有效鉴定.方法 采集健康志愿者唾液样本,提取样本总RNA,利用终点逆转录-聚合酶链反应(Endpoi
【机 构】
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公安部物证鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室法医遗传学公安部重点实验室,北京 100038;湖北医药学院,湖北十堰 442000
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目的 基于唾液中特异表达的mRNA标记分子,建立五重荧光复合检测系统,实现对唾液的有效鉴定.方法 采集健康志愿者唾液样本,提取样本总RNA,利用终点逆转录-聚合酶链反应(Endpoint Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,Endpoint RT-PCR)技术扩增3个唾液特异mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH和2个管家基因GAPDH、ACTB,通过毛细管电泳分离检测特异性产物,构建起五重mRNA荧光复合检测体系.同时使用100份样本和6份室温晾干1M、6M的唾液斑样本对体系的特异性、重复性和灵敏度进行验证.结果 在40份唾液样本中均检测到唾液mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH以及管家基因GAPDH、ACTB共5个特异性的峰,而在外周血、月经血、精液和阴道分泌物样本中仅检测到管家基因GAPDH、ACTB,检测灵敏度可达2ng总RNA,且在室温晾干1M、6M的唾液斑样本中仍能检测到唾液特异性标记分子.结论 本研究建立五重mRNA荧光复合扩增检测系统可以有效的将唾液与其他4种法医学常见的体液区分.
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