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采用ＰＣＲ技术从ｒｅｃ－Ｍ１３ｍｐ１８中扩增出１２０ｂｐ的大鼠肝ｔＲＮＡ＾Ｉｌｅ合成基因片段，经限制性内切酶ＢｓｔＮＩ酶切后作为模板，利用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶在体外无细胞体系转录由Ｔ７启动子带动的大鼠肝ｔＲＮＡ＾ｉｌｅ基因，生成不含修饰碱基的ｔＲＮＡ＾ｉｌｅ，并对体外转录反应条件进行了优化，回收的ｔＲＮＡ产量要达ＤＮＡ模板一的４０倍 。