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目的前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建术腱-骨愈合情况是手术成败的关键因素。将不同浓度富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)/异种小牛脱蛋白骨(deproteinized bone,DPB)凝胶复合物作为骨隧道填充物,观察ACL重建后腱-骨愈合的组织学变化,探讨该复合物对腱-骨愈合的促进作用,并确定PRP的最佳浓度。方法取新西兰大白兔耳中央动脉血8mL,采用Landesberg方法制备PRP,并将上清液作为稀释剂,制备浓度分别为30%、60%、100%的PRP。取新鲜新生小牛股骨骺端松质骨,经30%H2O2、乙醚交替浸泡24h,连续6次,制备DPB。将DPB浸泡于不同浓度PRP中并加入激活剂制备PRP/DPB凝胶复合物。取54只8～12月龄新西兰大白兔,体重(2.5±0.4)kg,随机分成3组(n=18),分别为30%PRP/DPB凝胶复合物组(A组)、60%PRP/DPB凝胶复合物组(B组)、100%PRP/DPB凝胶复合物组(C组)。实验动物制备双侧ACL缺损模型。随机取一侧下肢以对应浓度的PRP/DPB凝胶复合物作为骨隧道填充物,以自体半腱肌肌腱重建ACL,作为实验侧;另一侧行自体半腱肌肌腱重建ACL,作为对照侧。术后观察各组动物一般情况,于术后3、6、12周取材行大体观察及HE染色,光镜下观察腱-骨愈合情况,并参照Demirag等标准对腱-骨界面愈合情况进行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级半定量评价。结果大体观察:术后3周各组关节滑液稍增多,股骨隧道内未见骨样组织;6周时各组无关节积液,隧道内口见瘢痕组织增生;12周时各组移植肌腱与骨隧道壁纤维组织连接致密。组织学观察:A组实验侧术后3周,腱-骨界面间形成新生肉芽组织界面;6周时腱-骨界面间出现宽度不一的Sharpey样纤维;12周时腱-骨界面Sharpey样纤维排列有序,形成不规则、模糊的"潮线"。B组实验侧在各时间点腱-骨界面胶原纤维连接均优于其他各组;术后3周腱-骨界面发现排列较规整的类软骨细胞;6周时腱-骨界面骨隧道类软骨细胞单位面积数量明显多于其他组;12周时腱-骨界面可见移植物类软骨细胞增生,分化成熟,Sharpey样纤维连接致密有序。C组实验侧3周时腱-骨界面胶原纤维连接与A组实验侧及对照侧相似,6、12周相对成熟的致密结缔组织分化较差。参照Demirag等标准对腱-骨界面愈合进行分级,术后3、6周B组实验侧和对照侧、术后12周B组实验侧与C组实验侧,比较差异均有统计学意义(P<0.05);其余各组实验侧之间以及同组实验侧与对照侧比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PRP浓度为60%时,其与DPB的复合物形成凝胶后具有良好的生物相容性和骨诱导作用,可提高兔ACL重建术后腱-骨愈合。