百脉根Rac1蛋白多克隆抗体的制备与应用

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyang2005
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Rop基因在豆科植物与根瘤菌共生互作过程中发挥重要作用。该研究以模式豆科植物百脉根根系cDNA为模板,扩增得到百脉根的1个Rop基因(Rac1),将其连接到原核表达载体pET28a,转化获得Rac1基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌。优化Rac1蛋白诱导表达条件,亲和吸附法纯化蛋白,制备Rac1多克隆抗体,并应用该抗体检测Rac1过表达转基因植株中Rac1蛋白的表达水平。结果显示:(1)经双酶切和测序鉴定,成功构建pET28aRac1原核表达载体。(2)Rac1蛋白的最佳诱导表达条件为:IPTG浓度0
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