【摘 要】
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目的:探讨应用小干扰RNA(siRNA)沉默CD74和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因对Capan-2细胞神经侵袭力及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响及其机制。方法:空白载体处理Capan-
【机 构】
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广州医科大学附属市一人民医院消化内科;
【基金项目】
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广东省自筹经费类科技计划项目(2017ZC0315)
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目的:探讨应用小干扰RNA(siRNA)沉默CD74和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因对Capan-2细胞神经侵袭力及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响及其机制。方法:空白载体处理Capan-2细胞设为对照组,CD74-siRNA慢病毒稳定感染Capan-2细胞设为实验组。Transwell实验检测细胞侵袭能力,体外嗜神经侵袭(PNI)实验检测细胞神经侵袭力。靶向MIF的siRNA进一步处理两组细胞,免疫印迹法检测CD74、MIF、HIF-1α、CX3CR1和ERK1/2蛋白表达。结果:Transwell实验显示,对照组和实验组穿膜细胞数分别为(139.1±9.9)个/孔、(102.5±9.0)个/孔;体外PNI实验显示,对照组和实验组的穿膜细胞数分别为(144.9±13.1)个/孔、(104.6±10.4)个/孔,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01),显示沉默CD74基因可显著抑制Capan-2细胞的侵袭能力和PNI能力。免疫印迹显示沉默CD74基因可明显抑制Capan-2细胞CD74蛋白表达,HIF-1α和CX3CR1等蛋白表达量也同时下降(均P<0.01)。MIFsiRNA不影响Capan-2细胞CD74蛋白表达(P>0.05); CD74-siRNA或MIF-siRNA均明显降低ERK1/2蛋白表达,二者联合转染抑制ERK1/2蛋白表达的效能最大(均P<0.01)。结论:沉默CD74可能通过MIFERK1/2信号通路,降低HIF-1α和CX3CR1蛋白表达而抑制Capan-2细胞侵袭和PNI能力。
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