观察沉默特异性核基质蛋白1(SATB1)基因对裸鼠前列腺癌DU145移植瘤的抑制作用。
方法利用LipofectamineTM 2000将pSilencer3. 1-SATB1、pSilencer3. 1转染至人前列腺癌DU145细胞,建立前列腺癌DU145荷瘤鼠模型,分为3组:转染pSilencer3. 1-SATB1 DU145组、转染空质粒pSilencer3. 1 DU145组和未转染DU145组,每组各8只。取浓度为2×1010/L转染pSilencer3. 1-SATB1的DU145、转染空质粒pSilencer3. 1的DU145和未转染的DU145细胞悬液0. 2 ml分别注射至各组裸鼠左腋皮下。每隔4 d测量皮下移植瘤体积,绘制瘤体生长曲线。免疫组织化学法和Western blot法检测各组瘤体SATB1表达。免疫组织化学法检测各组瘤体E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达。原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测移植瘤凋亡。
结果Western blot 结果表明:转染pSilencer3. 1-SATB1 DU145组可有效沉默SATB1基因并成功构建了人前列腺癌DU145细胞裸鼠皮下移植瘤模型。第27天时处死裸鼠后,转染pSilencer3. 1-SATB1 DU145组移植瘤体积(mm3)为708. 9±69. 1,显著小于对照组,差异有统计学意义(P< 0. 05);原位缺口末端标记法(TUNEL)结果显示:转染pSilencer3. 1-SATB1 DU145组平均凋亡率为(67. 6±6. 2)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P< 0. 05);免疫组织化学法显示:Vimentin、MMP-2、E-cadherin在转染pSilencer3. 1-SATB1 DU145组的平均值分别为102. 8±9. 7、120. 3±17. 8、407. 0±13. 9,与对照组比较,蛋白表达差异均有统计学意义(P< 0. 05)。
结论成功构建沉默SATB1基因的前列腺癌DU145细胞荷瘤鼠模型。沉默SATB1可抑制前列腺癌细胞的增殖生长、促进其凋亡。沉默SATB1可能通过调控侵袭相关蛋白E-cadherin、Vimentin、MMP-2的表达水平。