【摘 要】
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以人胎盘脐带组织为材料,提取组织总RNA,用net-RT-PCR方法合成人血管能抑素cDNA基因,将该cDNA克隆进pSP72载体获得重组质粒pSP72C, DNA序列分析结果与预期序列一致.用BamHⅠ
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以人胎盘脐带组织为材料,提取组织总RNA,用net-RT-PCR方法合成人血管能抑素cDNA基因,将该cDNA克隆进pSP72载体获得重组质粒pSP72C, DNA序列分析结果与预期序列一致.用BamHⅠ和NdeⅠ双酶切,切下pSP72C上的血管能抑素cDNA,插入pET-3c载体的相应位点获得重组表达质粒pETC, 转化E. coli BL21(DE3), SDS-PAGE分析显示:在IPTG诱导下,血管能抑素基因获得了高效表达,表达量约占菌体总蛋白的 27.9 %,主要以包涵体形式存在.包涵体经过洗涤
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