【摘 要】
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目的 探讨影响酶联免疫斑点 (ELISPOT)实验特异性及敏感性的因素 ,优化酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的实验条件。方法 HLA A2阳性正常人的外周血单个核细胞在
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目的 探讨影响酶联免疫斑点 (ELISPOT)实验特异性及敏感性的因素 ,优化酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的实验条件。方法 HLA A2阳性正常人的外周血单个核细胞在体外经流感病毒抗原肽诱导 1周后 ,观察不同实验条件对酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的影响。结果 CTL诱导时 ,效应细胞先分离出CD8+ T细胞组获得的Flu抗原特异的细胞频数要高于CTL诱导后再分离出CD8+ T细胞组 (P <0 .0 5 ) ;自体DC(树突状细胞 )作APC(抗原提呈细胞 )比自体CD8- PBMC作APC ,CTL的诱导效率高且特异 (P <0 .0 5 ) ;使用细胞因子组合 (IL 7+IL 2 +IL 6 )优于单纯使用IL 2。CTL行ELISPOT检测时 ,T2 2细胞较T2 1细胞具有更强抗原提呈功能 ,增加Flu抗原特异的CD8+ T细胞频数 (P <0 .0 5 )。结论 优化了酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的试验条件 ,优化后的方法在临床肿瘤疫苗的研究中具有应用价值
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