观察血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)对血管内皮细胞生长因子(VEGF)介导的血管新生的抑制作用。
方法以不同浓度的ADAMTS13 (1、5、25、50、100 nmol/L )处理脐带静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT法检测ADAMTS13对HUVEC增殖的影响,通过管腔形成实验观察ADAMTS13对HUVEC分化的影响,通过刮伤愈合实验观察ADAMTS13对HUVEC迁移的影响,利用鸡胚绒毛尿囊膜实验和基质胶塞实验观察ADAMTS13在体内对血管新生的影响。
结果与对照组相比,25、50、100 nmol/L ADAMTS13对HUVEC增殖均有明显的抑制作用(P值均<0.01)。在刮伤愈合实验中,制造损伤8 h后,对照组HUVEC的迁移距离为(79±22)μm, VEGF处理组为(250±8)μm,VEGF+ADAMTS13处理组为(170±23)μm,组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在管腔形成试验中,VEGF处理组、VEGF+ADAMTS13处理组HUVEC培养16 h后形成的管状结构长度分别是对照组的(450.6±16.6)%、(235.3±19.0)%,VEGF+ADAMTS13处理组管状结构少于VEGF处理组(P< 0.001)。鸡胚绒毛尿囊膜实验中,VEGF (20 ng/ml)、ADAMTS13 (100 nmol/L)、ADAMTS13 (100 nmol/L)+VEGF(20 ng/ml)处理组的血管形成数量分别为对照组的(228.2±10.8)%、(69.2±21.1)%、(184.6±15.2)%。基质胶塞实验结果显示VEGF+ADAMTS13处理组小鼠体内的血管数量为VEGF组的43.5%。
结论体外实验结果表明ADAMTS13对HUVEC增殖、分化、迁移能力均有抑制作用;体内实验结果提示ADAMTS13对血管新生有抑制作用。