【摘 要】
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目的 探讨肿瘤增殖型腺病毒(Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP)介导的以人Survivin为靶标的RNA干扰对结肠癌细胞株HT-29中Survivin mRNA和蛋白表达及对HT-29增殖凋亡的影响.方法 用Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP转染结肠癌细胞株HT-29(以携带相同shRNA的增殖缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照),用逆转
【机 构】
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400016,重庆医科大学附属第一医院普通外科,重庆市普通外科学重点实验室,400016,重庆医科大学附属第一医院普通外科,重庆市普通外科学重点实验室
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目的 探讨肿瘤增殖型腺病毒(Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP)介导的以人Survivin为靶标的RNA干扰对结肠癌细胞株HT-29中Survivin mRNA和蛋白表达及对HT-29增殖凋亡的影响.方法 用Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP转染结肠癌细胞株HT-29(以携带相同shRNA的增殖缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测转染后的HT-29细胞中Survivin mRNA和蛋白表达的变化,用噻唑蓝(MTT)法、吖啶橙/溴乙锭荧光染色法、Annexin V-PE/7-AAD联合染色法检测细胞死亡率及凋亡率.结果 与复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体比较,转染Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP后,HT-29细胞中Survivin mRNA拷贝数及蛋白表达显著降低,其细胞死亡率和凋亡率显著提高(P＜0.05).结论 Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP介导的RNA干扰较之增殖缺陷型腺病毒载体和脂质体载体具有更高的干扰效率,且能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖。
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