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目的：为保证应用咖啡因代谢探针的正确性，建立了反相高效液相色谱测定尿中咖啡因代谢物的方法。方法：采用Shim-pack VP—COD柱（4，6mm×150mm，5μm），岛津Shim—pack C18预柱，流动相为乙腈-0．05％醋酸，0—24min时0．05％醋酸的量从2．5％线性增加至8％，流速为1mL·min^-1，柱温25℃，检测波长为280nm。结果：咖啡因5种代谢物均能良好分离，在所考察的范围内有良好的线性。r为0．9998—0．9999，平均回收率95．59％-102．2