【摘 要】
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目的评价血红素加氧酶-1(HO-1)在脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体活化中的作用。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以4×104个/ml密度接种于96孔板。采用随机数字表法分为4组(n＝48)：对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS＋HO-1 siRNA组(L＋HO-1 siRNA组)和LPS＋Con siRNA组(L＋
【机 构】
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天津医科大学南开临床学院 天津市南开医院麻醉科 300100,天津医科大学南开临床学院 天津市南开医院麻醉科 300100,天津医科大学南开临床学院 天津市南开医院麻醉科 300100,天津医科大学南
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目的评价血红素加氧酶-1(HO-1)在脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体活化中的作用。
方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以4×104个/ml密度接种于96孔板。采用随机数字表法分为4组(n＝48)：对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS＋HO-1 siRNA组(L＋HO-1 siRNA组)和LPS＋Con siRNA组(L＋Con siRNA组)。C组正常培养，L组、L＋HO-1 siRNA组和L＋Con siRNA组向各培养基中加入10 μg/ml LPS刺激NR8383细胞，L＋HO-1 siRNA组LPS刺激前48 h给予HO-1 siRNA转染，L＋Con siRNA组LPS刺激前48 h给予Con siRNA转染。LPS刺激后各组均孵育24 h收集细胞，测定细胞活力，采用RT-PCR法检测HO-1和NLRP3 mRNA表达，采用Western blot法检测HO-1、NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)及caspase-1表达，采用ELISA法测定上清液IL-1β和IL-18的浓度。
结果与C组比较，L组、L＋HO-1 siRNA组和L＋Con siRNA组细胞活力降低，HO-1和NLRP3及其mRNA、ASC及caspase-1表达上调，IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05)；与L组比较，L＋HO-1 siRNA组细胞活力降低，HO-1及其mRNA表达下调，NLRP3及其mRNA、ASC及caspase-1表达上调，IL-1β和IL-18浓度升高(P<0.05)，L＋Con siRNA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。
结论HO-1参与了LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞NLRP3炎性小体活化的过程。
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