结核分枝杆菌19kD-ESAT6融合蛋白的克隆表达及纯化

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运用聚合酶链反应(PCR)技术从结核分枝杆菌标准株H37Rv中扩增获得19kD脂蛋白和esat-6基因片段,将目的片段分别克隆到pMD18-T载体,再亚克隆目的片段到同一表达载体pET-21a,构建重组表达载体pET21a-19kD-ESAT6,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),表达纯化后用蛋白质印迹法(Western blot)分析其抗原反应性。结果成功构建了重组质粒pET21a-19kD-ESAT6,并在大肠埃希菌中获得高效表达。SDS-PAGE结果显示,在相对分子质量(Mr)约291×0
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