论文部分内容阅读
目的 探讨强心苷药物洋地黄毒苷对下咽癌Fadu细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 0、50、100、200和400 nmol/L的洋地黄毒苷不同时间点处理Fadu细胞,细胞计数试剂(CCK-8)和三磷酸腺苷(ATP)发光法检测Fadu细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术和Caspase3/7活细胞荧光实时法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测PI3K和AKT总蛋白和磷酸化蛋白水平.结果 细胞增殖检测结果显示,洋地黄毒苷剂量和时间依赖性抑制FaDu细胞增殖,48 h后,CCK-8检测值分别为0.73±0.02、0.63±0.02、0.43±0.02和0.23±0.02,低于对照组的 1.27±0.05,F浓度=17 810.000,P＜0.001;F时间=230.900,P＜0.001;F时间×浓度=292.100,P＜0.001,IC50值为102 nmol/L.而 ATP 检测值为360 175.00±15 432.88、277 193.00±20 311.25、212 869.66±9 955.65和 164 726.66±12 536.46,低于对照组的682 460.66±37 594.12,F浓度 =345.600,P = 0.003;F时间=120.700,P＜0.001;F时间x浓度=95.000,PP＜0.001.细胞凋亡检测结果显示,随着洋地黄毒苷浓度增加,FaDu细胞的凋亡率增加到(20.42±1.54)％和(34.58±2.16)％,高于对照组的(11.94±1.39)％,F浓度=130.100,P＜0.001;而凋亡相关蛋白Caspase3/7的活性增加到33 986.00±2 513.50和43 786.33±1 736.32,高于对照组的22 652.66±2 162.53;F浓度= 71.860,P＜0.001.蛋白质印迹法分析结果显示,洋地黄毒苷能剂量性的降低p-PI3K蛋白到0.51±0.04和0.18±0.002,低于对照组的1.00±0.07,F浓度=276.400,P＜0.001;而 p-AKT 蛋白降低到0.46±0.03和0.13±0.004,低于对照组 1.00±0.05,F浓度 =483.500,P＜0.001.结论 洋地黄毒苷可能通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导下咽癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖.