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应用PCR方法,扩增人纤溶酶原cDNA基因中K4K5 cDNA片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,获得表达质粒p9kkk-18.该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD筛选高拷贝表型,PCR筛选K4K5 cDNA与酵母染色体整合形成的阳性克隆,阳性克隆用甲醇诱导表达.表达产物r-K4K5分子量约21.5kD,占分泌总蛋白80%以上,产物浓度为150~250mg/L.初步纯化产物抑制牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖与鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成.