【摘 要】
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将AGR2基因的shRNA表达序列连接到pSUPER质粒中,获得pSUPER-shAGR2质粒,经测序鉴定后,将pSUPER-shAGR2和pSUPER质粒通过Lipofectamine2000转染MCF7细胞,经流式细胞仪和600μg
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将AGR2基因的shRNA表达序列连接到pSUPER质粒中,获得pSUPER-shAGR2质粒,经测序鉴定后,将pSUPER-shAGR2和pSUPER质粒通过Lipofectamine2000转染MCF7细胞,经流式细胞仪和600μg.mL-1G418筛选获得稳定干扰AGR2的MCF7细胞系和对照细胞系,Western blot检测其RNA干扰效果,MTT检测细胞生长情况;用无血清酚红培养基饥饿12 h后,25 ng.mL-1EGF处理15 min,Western blot检测ERK活化和PARP水平。
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