【摘 要】
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目的 了解系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞脂筏及细胞骨架蛋白的表达及分布.方法 密度梯度离心法分离SLE和健康对照者外周血单个核细胞,磁珠分选纯化B细胞.用异硫氰酸荧光素(FITC)标志的霍乱毒素B亚单位(CTB)对B细胞脂筏染色,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜分析；用罗丹明标志的鬼笔环肽对B细胞骨架蛋白染色,激光共聚焦显微镜观察.并设空白对照组、来氟米特组干预培养活动期SLE患者B细胞4h
【机 构】
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汕头大学医学院,510080广州,广东省医学科学院广东省人民医院风湿免疫科,510080广州,广东省医学科学院广东省人民医院风湿免疫科,510080广州,广东省医学科学院广东省人民医院风湿免疫科,51
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目的 了解系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞脂筏及细胞骨架蛋白的表达及分布.方法 密度梯度离心法分离SLE和健康对照者外周血单个核细胞,磁珠分选纯化B细胞.用异硫氰酸荧光素(FITC)标志的霍乱毒素B亚单位(CTB)对B细胞脂筏染色,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜分析；用罗丹明标志的鬼笔环肽对B细胞骨架蛋白染色,激光共聚焦显微镜观察.并设空白对照组、来氟米特组干预培养活动期SLE患者B细胞4h,流式细胞术检测B细胞脂筏的改变.同时记录受试患者的临床资料SLE疾病活动指数(SLEDAI).计量资料进行方差分析或配对t检验,相关性分析采用Pearson法分析.结果 SLE活动组、治疗缓解组CTB-FITC与外周血B细胞脂筏结合率较健康对照组明显增高[(59±4)％,(51±5)％,(33±4)％,F=9.21,P=0.001].共聚焦显微镜观察B细胞脂筏及骨架蛋白的分布及表达时发现,在健康对照组中,脂筏主要均匀分布于B细胞膜中,散在出现小范围聚集；骨架蛋白主要分布于B细胞的外层.而在SLE组中,B细胞脂筏可出现表达和分布的异常,呈现细胞膜荧光染色厚度的增加、聚集范围扩大及荧光强度的增强；同时伴随着B细胞膜骨架蛋白染色荧光强度的减弱.在SLE活动组中,患者外周血B细胞脂筏表达水平与其SLEDAI呈正相关(r=0.632,P=0.028).并且,与空白对照相比,干预培养后来氟米特能降低CTB与活动期SLE患者B细胞脂筏结合率[(48±5)％和(39±5)％,t=2.29,P=0.048)].结论 SLE患者外周血B细胞脂筏和骨架蛋白的表达和分布存在异常,B细胞脂筏和骨架蛋白表达的调节可能在治疗SLE中具有一定的作用。
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