【摘 要】
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目的 观察去氢骆驼蓬碱(HM)对细粒棘球蚴不同类型DNA损伤修复基因表达量的影响. 方法 以细粒棘球蚴为实验材料,以HM为药物,以虫体不同类型DNA损伤修复方式(同源重组修复、非
【机 构】
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新疆医科大学药学院,新疆乌鲁木齐,830054;南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210023;新疆医科大学第一附属医院药学部
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目的 观察去氢骆驼蓬碱(HM)对细粒棘球蚴不同类型DNA损伤修复基因表达量的影响. 方法 以细粒棘球蚴为实验材料,以HM为药物,以虫体不同类型DNA损伤修复方式(同源重组修复、非同源末端连接修复、碱基切除修复)及核苷酸切除修复通路的关键修复基因为目的基因设计引物,筛选确定qRT-PCR反应体系,采用该体系检测基因的差异表达水平,分析HM对细粒棘球蚴不同类型DNA损伤修复相关基因的影响. 结果 筛选的细粒棘球蚴DNA损伤修复类型代表基因BRCA1引物F:5'-TGATTGCGACCTAAGAGAC-3',R:5'-TTCCATACACAAGCCATCC-3');KU70引物F:5'-TGATTGCGACCTAAGA GAC-3',R:5'-GTCGCCATCTCAACTTCA-3');OGG1引物5'-CGCTATG-GTAAGAAGATGTG-3',R:5'-CGTGAAGATGGATGGAGAA-3');ERCC1引物F:5'-TCGTGCTCATTGTGTTAGT-3',R:5'-CTCCTCTGGTGGCTTATTC-3').各基因扩增曲线Ct值可用,溶解曲线特异性良好.qRT-PCR检测各样品组BRCA1,KU70,OGG1基因表达均有不同程度上调,DOX组分别为26.05倍,323.44倍,29.63倍,HM组分别为7.24倍,55.65倍,3.22倍,以KU70和BRCA1基因上调尤为明显.ERCC1基因表达量DOX组显著上调(上调倍数25.24),HM组无显著变化. 结论 HM对DNA双链断裂修复类型代表基因BRCA1,KU70,OGG1表达量有较大影响,而对ERCC1基因表达无显著影响.
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