银染mRNA差异显示方法的建立和吗啡诱导基因的克隆

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目的:建立非同位素银染mRNA差异显示方法,分离吗啡相关基因。方法:以吗啡处理的SH-SY5Y细胞中提取的总RNA为模板,用5’dT12MG锚定经物和两条随机引物合进行DDRT-PCT扩增,经测序凝胶电泳分离后,用银染方法显示差异DNA条带,在直视下从凝胶中回收差异条带并进行再扩增,扩增产物克隆入pGEM-T载体。结果建立了非同位素的银染mRNA差异显示方法,分离和克隆了一些吗啡诱导的差异表达基因
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